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反相色譜的影響因素：(1)柱長有機小分子和肽類的分辨率隨柱長的增加而增加.但是柱長增加并不能使蛋白質(zhì)和核酸等生物大分子的分辨率顯著增加.它們在較短的柱子上往往也有很好的分離效果。(2)流動相的流速。有機小分子和肽類的分辨率對流動相流速非常敏感。而蛋白質(zhì)和核酸等生物大分子的分辨率則不然。流速越小，柱子越長，色譜峰的寬度就越大，分辨率就越小。制備色譜上樣過程中的流速對動態(tài)吸附容量影響很大。(3)溫度。溫度上升，流動相黏度下降，流動速度加快，且流動相與固定相之間的傳質(zhì)速度加快，使分...

C4色譜柱是一款適合于蛋白質(zhì)分離分析用的產(chǎn)品。它使用3微米粒徑的硅膠填料，優(yōu)化了孔徑，固定相配體的烷基鏈長及表面鍵合密度，可實現(xiàn)高分辨率和高回收率的分析。使用短柱可以在高流速下實現(xiàn)快速分析。C4色譜柱在使用前，先進行柱的性能測試，并將結(jié)果保存起來，作為今后評價柱性能變化的參考。在做柱性能測試時要按照C4色譜柱出廠報告中的條件進行，只有這樣，測得的結(jié)果才有可比性。但要注意柱性能可能由于所使用的樣品、流動相、柱溫等條件的差異而有所不同。1、樣品的前處理：①先使用流動相溶解樣品；②...

HALO聚糖色譜柱是一種基于Fused-Core®技術(shù)的快速、高效型液相色譜柱。HALOGlycan是一種高極性固定相，通過創(chuàng)新的專有化學鍵合技術(shù)，將五羥基配體鍵合到硅膠的多孔殼層。這種高性能材料的色譜柱可用于親水作用色譜(HILIC)，以常規(guī)反相溶劑為流動相，分離低聚糖，尤其是蛋白質(zhì)連接的聚糖。鍵合相：專有的親水配體，HALOGlycan色譜柱USP分類：L95粒徑大?。?.7μm孔徑大?。?0A聚糖色譜柱優(yōu)勢及最佳應用：①提高酸性和兩性離子的保留；②對鹽濃度不敏感...

反相色譜柱是以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料，因此有較高的碳含量和更好的疏水性，對各種類型的生物大分子有更強的適應能力，適用范圍較廣，是高效液相色譜儀分析中首要選擇的色譜柱類型。目前，反相色譜柱適用范圍廣，從極性化合物到非極性化合物都可獲得良好的分離，在碳水化合物如低聚糖、苷類糖化學，生藥學和天然產(chǎn)物化學，生物物質(zhì)如多肽、蛋白、核酸等多個領(lǐng)域發(fā)揮重要作用。反相色譜柱的結(jié)構(gòu)及主要功能：本產(chǎn)品是由柱管、接頭、封頭、密封環(huán)、壓帽、篩板、柱填料等組成。1、柱管：多用不銹鋼制成，壓力不高于...

色譜柱由柱管、壓帽、卡套、篩板、接頭、螺絲等組成。柱管多用不銹鋼制成，壓力不高于70kg/cm2時，也可采用厚壁玻璃或石英管，管內(nèi)壁要求有很高的光潔度。為提高柱效，減小管壁效應，不銹鋼柱內(nèi)壁多經(jīng)過拋光。也有人在不銹鋼柱內(nèi)壁涂敷氟塑料以提高內(nèi)壁的光潔度，其效果與拋光相同。還有使用熔融硅或玻璃襯里的，用于細管柱。色譜柱兩端的柱接頭內(nèi)裝有篩板，是燒結(jié)不銹鋼或鈦合金，孔徑0.2~20μm（5~10&μm），取決于填料粒度，目的是防止填料漏出。色譜柱的作用機理：可以被認為是反相液相色譜...

Dewetting孔去濕現(xiàn)象在方法開發(fā)時需要考慮的一個重要因素就是固定相的“孔去濕”。當固定相為高疏水（如C18），且流動相從一個高有機相組分（40%乙腈或甲醇）變到另一個純水相或高水相組分的時候，就容易發(fā)生。這也是早期反相色譜柱常常遇到的問題。色譜柱在高壓條件下，流動相中的水會被“壓入”起保留作用的固定相孔結(jié)構(gòu)里；當泵停止后，水則不會再進入固定相孔內(nèi)。同時，由于固定相是疏水的，滯留于色譜柱中的水被從固定相孔結(jié)構(gòu)中排出。在重啟色譜泵后，即使是高壓也無法使流動相中的水重新回到固...

C18色譜柱根據(jù)極性分為正相柱和反相柱。正相柱大多以硅膠為柱，或是在硅膠表面鍵合-CN、-NH3等官能團的鍵合相硅膠柱；反相柱填料主要以硅膠為基質(zhì)，在其表面鍵合非極性的十八烷基官能團（ODS）稱為C18柱，其它常用的反相柱還C8、C4、C2和苯基柱等。C18色譜柱的構(gòu)造：由柱管、壓帽、卡套、篩板、接頭、螺絲等組成。柱管多用不銹鋼制成，也可采用厚壁玻璃或石英管，管內(nèi)壁要求有很高的光潔度。為提高柱效，減小管壁效應，不銹鋼柱內(nèi)壁多經(jīng)過拋光。也有人在不銹鋼柱內(nèi)壁涂敷氟塑料以提高內(nèi)壁的...

為了最大限度地延長高效液相色譜柱的使用壽命并確保其最佳性能，有必要對色譜柱進行適當?shù)木S護。許多不同因素可能導致色譜柱分離度和靈敏度降低，但通常情況下，下列因素會導致絕大多數(shù)色譜柱出現(xiàn)性能問題。1、污染物通常，樣品中含有來源于樣品基質(zhì)的成分，這些成分可能會吸附于色譜柱之上。鹽、脂類、增塑劑和聚合物是在分析過程中可能與固定相接觸的成分。這些成分會損壞色譜柱和檢測器，并在分析過程中出現(xiàn)雜質(zhì)峰。如果這些雜質(zhì)成分不能被流動相洗脫，它們就會吸附在色譜柱上。隨著時間的推移，分析物會與這些雜...

HALO色譜柱是指利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異，對混合物進行先分離，而后分析鑒定的儀器。液相色譜儀根據(jù)固定相是液體或是固體，又分為液-液色譜(LLC）及液-固色譜(LSC）?，F(xiàn)代液相色譜儀由高壓輸液泵、進樣系統(tǒng)、溫度控制系統(tǒng)、色譜柱、檢測器、信號記錄系統(tǒng)等部分組成。與經(jīng)典液相柱色譜裝置比較，具有高效、快速、靈敏等特點。HALO色譜柱對高沸點、難氣化合物的混合物通過色譜柱核淋洗劑并以實現(xiàn)分離。應用于生物醫(yī)學、環(huán)境化學、石油化工等部門。在選擇HALO色譜柱...

AMT公司為您富有挑戰(zhàn)的分離量身定做了多種孔徑，那么如何選擇正確的孔徑呢？?根據(jù)您的分子大小和樣品中分析物的分子量范圍（MWs）來匹配填料孔徑（表A）。?小分子（®90?分析。-較小孔徑的填料具有更大的比表面積，可提高小分子分析物的保留和載量。-當分析物與柱填料孔徑的比例大于0.1時，其在填料上的擴散就會嚴重受阻，從而導致峰展寬和保留變差。?對于大環(huán)抗生素和多肽蛋白生物分子，應使用較大的孔徑，如HALO®160?Peptide和HALO®400?Pro...

在分離度方程式中有三個變量：柱效（N）、選擇性（α）及保留因子（K）。我們可以看出，選擇性（α）是調(diào)整和提高分離度有效的參數(shù)。同時，色譜柱固定相是調(diào)整HPLC選擇性（見表B）中四個有效的參數(shù)之一。當然，對于離子化分析物，流動相pH是有效的調(diào)節(jié)參數(shù)。此外，與色譜柱固定相同樣重要的還有流動相中有機溶劑（乙腈vs甲醇）的選擇、及有機溶劑含量/梯度斜率等等。在開發(fā)一個色譜分析方法時，可以有多種方式來實現(xiàn)特定的分離和保留需求。一種是采取系統(tǒng)篩選多個固定相的方式，針對不同的分析，HALO...

柱外體積（ECV）是指色譜系統(tǒng)從進樣器到檢測器這段管路除去色譜柱的總體積。大部分新的高效液相色譜系統(tǒng)都經(jīng)過了優(yōu)化，因此，可以使用高效的核殼顆粒（SPP）色譜柱，例如HALO?，F(xiàn)在讓我們簡單概述一下高效液相色譜系統(tǒng)。一個典型的HPLC系統(tǒng)由脫氣機、泵、自動進樣器、柱溫箱和檢測器。我們可以仔細看一下里面。柱外體積通常來自進樣器，包括進樣器本身、連接進樣器與色譜柱的管路以及連接色譜柱與檢測器的管路、檢測器流通池、熱交換器以及各個連接配件所產(chǎn)生的任何體積。但是有很多舊的色譜儀仍在使用...